Приобретение вирусного сырья

Скрининг искусственных диет в помещении

На основе особенностей питания Helicoverpa Armigera проверяются от 3 до 5 составов искусственного рациона. После оптимизации для производства выбирается рецептура, обеспечивающая непрерывное выращивание и высокую яйценоскость.

Выращивание Helicoverpa Armigera в домашних условиях

Выловленные в дикой природе хлопковые совки одомашниваются с помощью режима постепенного замещения: чистый растительный корм → смесь овощей и искусственных кормов → полный искусственный корм, чтобы создать лабораторный штамм для массового выращивания.

Вирусная прививка

Когда примерно 80% личинок достигают 3-го возраста, очищенные семена вируса (свободные от различных бактерий) разводят в вирусную суспензию с концентрацией от 1,0×10⁴ до 1,0×10⁷ ПИБ/мл, которую подмешивают в рацион для кормления личинок.

Сбор больных мертвых личинок

Наблюдение начинают через 3 дня после кормления зараженным вирусом рационом. Мертвых и агонизирующих личинок с набухшими телами и красноватым брюшком собирают дважды в день (утром и вечером) до завершения сбора.

Извлечение и сохранение вируса

К трупам личинок добавляют соответствующее количество деионизированной воды и смесь измельчают до состояния суспензии с помощью многофункционального гомогенизатора. Измельчение прекращают, как только размер частиц соответствует техническим требованиям.

Обнаружение и подсчет

Идентификацию и количественный подсчет проводят с помощью электронного и оптического микроскопа соответственно. Расфасовка осуществляется после прохождения контроля.

Хранилище вирусов

Соответствующие вирусные суспензии разливают в герметичные пластиковые бочки и хранят на холодном складе при температуре от -10℃ до -20℃ для последующего использования.